Химический состав

Весь гирудин и ингибитор калликреина плазмы крови находятся в связанном состоянии, т.е. в составе липосомы, и лишь в бактерии-симбионте пиявок эти вещества находятся в свободном состоянии.

Выделить компоненты дестабилазного комплекса в гомогенном состоянии возможно лишь в результате разрушения полипептидной цепи дестабилазы. В этом случае освобождаются простагландиновый компонент дестабилазы, гирудин и ингибитор калликреина плазмы крови.

Характеристика простагландинового (липидного) компонента дестабилазы:

подобно простациклину ингибирует агрегацию тромбоцитов, стимулированную тромбином, Са2+-ионофором, АДФ, арахидоновой кислотой. Обладает гипотензивным действием, как при внутривенном, так и при оральном введении спонтанно гипертензивным животным.Гирудин выделен в гомогенном состоянии. Его активность и поведение соответствуют гирудину, выделенному по методу Марквардта.

Характеристика ингибитора калликреина плазмы крови. Особый интерес представляет ИК, который в свободном состоянии проявляет свойства, не обнаруживаемые в составе липосомы (ДК). В результате разрушения липосомы ИК проявляет способность ингибировать трипсин.

Таким образом, дестабилаза, представляющая собой прочный белок-липидный комплекс, обладает высокой агрегационной способностью. В результате агрегирования мономеров дестабилазы образуется мицелла, способная менять свою пространственную ориентацию в зависимости от природы растворителя или контактирующего субстрата, - экспонируя при этом или гидрофильную, или гидрофобную части своей структуры. В результате контакта с кровью мицеллярная структура дестабилазы связывает свободные гирудин и ингибитор калликреина плазмы крови, образуя липосому, которая в водных растворителях проявляет активность всех компонентов ДК (т.е. дестабилазы, аналога простациклина, гирудина и ИК), тогда как в органических растворителях демонстрирует активность лишь дестабилазы и аналога простациклина. Мономерной формой липосомы является фракция ДК с ММ 25 kD.

Подобная структурная организация ДК обеспечивает не только стабилизацию входящих в его состав компонентов, но и облегчает проникновение их путем активного переноса через мембрану клетки (трансмембранный перенос) как при внутривенном, так и пероральном введении экспериментальным животным.

Липосомальная природа ДК обеспечивает и важную физиологическую роль этого комплекса, как универсального тромболитического агента: быстрое проникновение ДК через мембрану клетки, прикрепление за счет липидного компонента дестабилазы к поврежденному участку сосудистой стенки и к пристеночному тромбу, медленный лизис фибринового сгустка за счет изопептидазной активности дестабилазы и препятствование дальнейшему тромбообразованию за счет блокады тромбина, калликреина плазмы крови, агрегации и адгезии тромбоцитов. Таким образом, природная липосома - ДК является агентом, обеспечивающим как профилактическое противотромботическое, так и тромболитическое действие.

Гидрофильная часть дестабилазы связана с цепями гирудина и ИК, которые аллостерически модифицируют активный центр дестабилазы и формируют в пространстве участок связывания с лизином. Связывание ИК и дестабилазы происходит в области связывания субстратов активных центров. Активный центр дестабилазы находится в непосредственной близости от липидной части молекулы, что обеспечивает проявление активности в разнополярных растворителях [2,15,23,].