Микроскопическое исследование ликвора

Изучение клеточного состава СМЖ является важной частью ликворологического исследования. Оно имеет важное значение при диагностике ряда воспалительных заболеваний нервной системы, инсультов, опухолей ЦНС и других патологических процессов.

Подсчет эритроцитов.

Количество эритроцитов в ликворе подсчитывают в счетной камере Горяева. Для этого СМЖ с примесью крови разводят в 10 раз - 9 частей изотонического раствора хлорида натрия и 1 часть СМЖ смешивают в пробирке. Полученную жидкость тщательно перемешивают, заполняют счетную камеру Горяева и, согласно правилам подсчета количества эритроцитов крови, определяют число эритроцитов в пяти больших квадратах. Количество эритроцитов в 1 мкл СМЖ определяют по формуле:

где А - количество эритроцитов в пяти больших (80 малых) квадратах, 1/4000 - объем малого квадрата, 10 - разведение спинномозговой жидкости, 80 - количество малых квадратов.

· При наличии в 1 мкл СМЖ 680-700 эритроцитов ее цвет изменяется макроскопически.

· При 900-1000 эритроцитов в 1 мкл наблюдается опалесценция.

· При 2000 эритроцитов появляется едва заметное розовое окрашивание.

· При 4000-5000 эритроцитов - СМЖ приобретает геморрагический характер.

Для диагностики внутричерепной геморрагии значение имеет не столько абсолютное количество эритроцитов, сколько нарастание их числа при повторном исследовании ликвора.

Основным признаком геморрагического инсульта является присутствие в СМЖ крови - от 400 до 2 500 000 эритроцитов в 1 мкл.

Подсчет лейкоцитов.

Лейкоциты подсчитывают в счетной камере после разрушения эритроцитов с помощью 10% уксусной кислоты или реактива Самсона (Samson), который считается лучшим раствором для разрушения эритроцитов и консервации лейкоцитов.

Ход исследования: с целью разрушения эритроцитов СМЖ предварительно смешивают в пробирке в соотношении 10 : 1 с 10% раствором уксусной кислоты, окрашенный метиловым фиолетовым, либо в аналогичной пропорции с реактивом Самсона. После тщательного перемешивания (ввиду того, что клетки СМЖ имеют свойство плотно приклеиваться к стенкам пробирки), полученной смесью заполняют камеру Фукса-Розенталя, которая состоит из 16 больших квадратов, каждый из которых разделен на 16 малых квадратов - всего 256 квадратов. Глубина камеры 0,2 мм, общий объем камеры 3,2 мкл. Лейкоциты считают по всей сетке (во всех 256 квадратах) при малом увеличении микроскопа (окуляр 15 х, объектив 8 х). При плеоцитозе более 200 × 106/ л считают половину сетки и результат умножают на 2, при плеоцитозе более 1000 - подсчитывают один ряд больших квадратов и результат умножают на 4.

Нормальные величины.

До сих пор при подсчете лейкоцитов в ликворе можно встретить различные единицы измерения, нередко даже в одной монографии или руководстве. Количество клеток указывают либо в 3 мкл (по сути, из расчета количества клеток на 1 камеру Фукса-Розенталя), либо в 1 мкл, либо количество клеток × 106/ литр (система СИ). Это создает дополнительные трудности в оценке получаемых результатов.

Таблица1. Цитоз у взрослых в норме.

Таблица 2. Плеоцитоз при различных заболеваниях ЦНС (по Е.М. Цветановой, 1986)