Качественный анализ липофильной фракции

На ТСХ в системе растворителей диэтиловый эфир - гептан (1:2) помимо пятен, соответствующих каротиноидам, наблюдали четыре пятна с голубой и зеленоватой флюоресценцией. Вещества не давали положительных реакций при обработке хроматограмм спиртовым раствором AlCL3; 5%-ным раствором Na2CO3 и 1%-ным водным раствором FeCL3. три из этих веществ были выделены с помощью препаративной ТСХ. Они представляли собой масла с характерным запахом и имели УФ - спектры в этаноле в области 215 - 225 нм, следовательно, это не ароматические вещества. И так как по значению Rf на ТСХ, и окраске, они совпали с веществами обнаруженными нами в эфирном масле, мы предположили, что это терпены.

Качественный анализ липофильной фракции на наличие фланоидных соединений

Для предварительного обнаружения флавоноидов в экстракте выполняли цианидиновую реакцию (проба Синода).

,1г густого экстракта растворяли при нагревании в 5 мл 96%-ном этиловом спирте, добавляли порошок металлического магния и, осторожно, концентрированную хлористоводородную кислоту. Появление красного окрашивания свидетельствовало о наличии флавоноидов.

Дальнейшее исследование экстракта проводили с помощью ТСХ и восходящей БХ. Использовали системы растворителей:

1) н - бутанол : уксусная кислота : вода (4 : 1 : 5) - для БХ;

2) этанол - хлороформ (0,5:9) - для ТСХ.

На бумажной хроматографии обнаружили пятно, имеющее в УФ - свете желтую окраску (Rf = 0,62). Хроматограммы обрабатывали: 10%-ным раствором Na2CO3 ; парами аммиака; реактивом Бенедикта для приготовления которого 17,3 г цитрата натрия и 11,7 г Na2CO3 × 10Н2О и смешивали с 1,73 г CuSO4 × 5H2O, растворенном в 10мл дистиллированной воды. (Реактив позволяет обнаружить орто - дигидроксигруппировку в боковом фенольном радикале).

На ТСХ также наблюдали одно пятно, имеющее темно - коричневую окраску в УФ - свете и значение Rf = 0,60. Хроматограммы обрабатывали концентрированной серной кислотой и 5% -ным раствором NaOH.

Результаты анализа представлены в таблице 11.

Таблица 11

Качественный анализ флавоноидов с помощью ТСХ